Stabilizor T1 生物樣品穩(wěn)定儀

1 生物樣品穩(wěn)定儀

   在蛋白質(zhì)組研究中，要得到準(zhǔn)確可靠的結(jié)果，很大程度上取決于樣品的前處理方法。保持樣品的穩(wěn)定性，即樣品是否反映目標(biāo)蛋白質(zhì)在活體內(nèi)的原始狀態(tài)則尤為重要。一旦樣品從機(jī)體分離，調(diào)控平衡被打破，對(duì)于某些蛋白質(zhì)或多肽，離體降解是一個(gè)很快速的過程。降解導(dǎo)致蛋白質(zhì)的種類、含量和修飾快速變化，使得檢測(cè)到的部分蛋白質(zhì)或肽段實(shí)際上是高豐度蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)生的片段，而不是樣品的原始蛋白質(zhì)。 

   在細(xì)胞和組織表達(dá)的蛋白質(zhì)組中，發(fā)揮重要生理功能、最具研究意義和價(jià)值的蛋白質(zhì)通常是一些含量很小、穩(wěn)定性差的低豐度蛋白質(zhì)或多肽。隨著蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，檢測(cè)方法的靈敏度越來越高，也對(duì)樣品前處理方法提出了更高的要求，如何在處理樣品過程中保留這些蛋白質(zhì)或多肽就變得越來越重要。

    因此采用一種快速、有效的樣品穩(wěn)定方法，盡量縮短樣品采集與穩(wěn)定之間的間隔時(shí)間并將樣品前處理過程標(biāo)準(zhǔn)化，對(duì)于蛋白質(zhì)研究具有重要意義。高質(zhì)量的樣品前處理有利于獲得高質(zhì)量的數(shù)據(jù)，進(jìn)而增強(qiáng)分析結(jié)果的可靠性和可比性。 

    Stabilizor系統(tǒng)是瑞典Denator公司的專利生物樣品穩(wěn)定技術(shù)。該系統(tǒng)包含Stabilizor T1主機(jī)和Maintainor樣品卡，用于解決蛋白質(zhì)離體降解的難題。Stabilizor系統(tǒng)能快速、均勻、準(zhǔn)確的將熱量傳遞給樣品，破壞蛋白質(zhì)中的氫鍵，保留氨基酸鏈的共價(jià)肽鍵，即破壞蛋白質(zhì)的二級(jí)及以上結(jié)構(gòu)，保留一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性。這種不可逆的失活效應(yīng)將樣品中的各種酶類失活，從而將蛋白質(zhì)離體降解的程度降到最低。處理過程中無需添加輔助抑制試劑，也將后期分析的干擾因素降到了最低。

    使用Stabilizor系統(tǒng)無需添加輔助抑制試劑即可永久性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，防止蛋白質(zhì)降解發(fā)生。降低蛋白質(zhì)組的復(fù)雜性，減少高豐度蛋白質(zhì)降解片段的干擾，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)/多肽生物標(biāo)記物的可能性。Stabilizor處理樣品具有的穩(wěn)定性、標(biāo)準(zhǔn)化和可追溯性，更易得到高質(zhì)量的分析數(shù)據(jù)。

    液氮速凍結(jié)合酶抑制劑是目前廣泛使用的阻止樣品降解的標(biāo)準(zhǔn)方法。但這種方法會(huì)破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使得樣品融化后，降解和修飾蛋白質(zhì)的酶分布得更廣泛，導(dǎo)致更多蛋白質(zhì)或其修飾形式發(fā)生改變。而且這種方法具有可逆性和選擇性，無法全面的阻止樣品中酶類的活性，添加的試劑還會(huì)干擾后期樣品分析，部分試劑具有一定毒性。

使用Stabilizor系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)：

是一種純物理的樣品穩(wěn)定方法，不需使用干擾后期分析的酶抑制劑

處理時(shí)間短，一般在一分鐘以內(nèi)即可將樣品中的各種酶類失活 

有利于保留樣品在活體內(nèi)蛋白質(zhì)的磷酸化和其它翻譯后修飾的真實(shí)狀態(tài)，保留不穩(wěn)定、易降解的低豐度蛋白質(zhì) 

避免了樣品中低豐度蛋白質(zhì)或多肽受高豐度蛋白質(zhì)降解片段的干擾，有助于發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)、多肽以及它們的修飾形式

永久性的去除蛋白酶和磷酸酶的活性，樣品經(jīng)穩(wěn)定后，即可在常溫下進(jìn)行制備操作，無需擔(dān)心酶對(duì)蛋白質(zhì)、多肽的降解或改變它們的修飾形式 

降低蛋白質(zhì)組的復(fù)雜程度，縮小動(dòng)態(tài)范圍，增加分析和發(fā)現(xiàn)具有重要價(jià)值的蛋白質(zhì)或多肽生物標(biāo)記物的可能性

使用方便，在采樣的同時(shí)即可穩(wěn)定樣品，縮短樣品離體降解的時(shí)間

樣品采集和儲(chǔ)存的過程高度標(biāo)準(zhǔn)化，使分析結(jié)果更加可靠，數(shù)據(jù)更具可比性，便于進(jìn)行比較蛋白質(zhì)組研究 

使用MALDI-MSI檢測(cè)目標(biāo)蛋白質(zhì)或多肽，Stabilizor是目前最為有效的樣品穩(wěn)定方法

技術(shù)參數(shù)：

Stabilizor T1主機(jī)
  4.3英寸彩色觸摸顯示屏
  對(duì)樣品卡施加真空壓力范圍：10—100mbar
  噪音：低于45分貝
  樣品尺寸測(cè)量激光分級(jí)：CLASS 1藍(lán)色激光
  內(nèi)置處理器：1 GHz×86，內(nèi)存為1GB
  操作系統(tǒng)：Linux開源軟件
  三個(gè)USB接口
  外部尺寸（L×W×H）：465×306×143mm
  凈重： 6.7kg
  功率：最高為350瓦，正常使用為70瓦，待機(jī)為20瓦
   電源：100-240V/50-60Hz
  使用環(huán)境溫度：10—40℃
  使用環(huán)境最大相對(duì)濕度：80%（無凝結(jié)）

Maintainor樣品卡
  外部尺寸（L×W×H）：85×54×2mm
  樣品腔尺寸：高7mm，直徑33mm
  使用環(huán)境最大相對(duì)濕度：85%（無凝結(jié)）
  材質(zhì)：PC，帶特氟龍涂層
  適用溫度：-80—100 ℃