凱氏定氮儀原理:
蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)含量。
1.有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO4,濃H2SO4 作用下,硝化生成(NH4)2SO4
反應(yīng)式為:
2NH2+H2S04+2H=(NH4)2S04 (其中CuSO4做催化劑)
2.在凱氏定氮器中與堿作用,通過蒸餾釋放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中
反應(yīng)式為:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O
3.用已知濃度的H2SO4(或HCI)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量,然后乘以相應(yīng)的換算因子,既得蛋白質(zhì)的含量
反應(yīng)式為:
(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
凱氏定氮儀使用的注意事項(xiàng)
1.若設(shè)定的加硼酸時(shí)間或加堿時(shí)間為零秒鐘,則自動(dòng)工作過程完成后顯示窗顯示“E”不閃動(dòng),發(fā)出“嘀———”約2s提示音。
2.若按下【啟動(dòng)】鍵后,三角瓶托盤仍處于下端,顯示窗顯示自下而上閃動(dòng)的“-”符號(hào),并發(fā)出“嘀-嘀-嘀”的提示音,提示應(yīng)放空三角瓶在托盤上,使托盤升起。
3.混合指示劑在堿性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色。
4.氨是否完全蒸餾出來,可用pH試紙測試餾出液是否為堿性。
5.向蒸餾瓶中加入濃堿時(shí),往往出現(xiàn)褐色沉淀物,這是由于分解促進(jìn)堿與加入的硫酸銅反應(yīng)生成氧化亞銅沉淀。
凱氏定氮儀的維護(hù)與保養(yǎng)
1.儀器應(yīng)避免安裝在陽光直射及過冷、過熱或潮濕的地方,室內(nèi)溫度不得超過10℃~30℃,通風(fēng)要好,應(yīng)有良好的散熱條件。
2.儀器前部槽皿中若積有液體,應(yīng)經(jīng)常擦凈。
3.長期使用后,在加熱器上會(huì)結(jié)有水垢,它將影響加熱效率。若水垢過厚,在關(guān)機(jī)狀態(tài)下斷電,可將蒸汽發(fā)生器頂上的一個(gè)旋塞擰下,在管口處插入一個(gè)小漏斗,注入除垢劑或冰醋酸清洗水垢(也可用稀釋后的硫酸)。清洗后,打開機(jī)箱內(nèi)蒸汽發(fā)生器排水節(jié)門將水排凈,并加入清水多次清洗。