流動相用一高壓泵輸入。這種高壓泵應(yīng)滿足以下條件：流量恒定，無脈動，并有較大的調(diào)節(jié)范圍。能抗溶劑腐蝕。有較高的輸出壓力，一般要達(dá)到15～300kg/c，也有的高達(dá)800kg/c。泵的死體積要小。梯度洗脫裝置必須具備兩臺高壓泵，一臺輸送強溶劑，一臺輸送弱溶劑，兩泵運轉(zhuǎn)速度用電腦控制，并可按一定的要求改變流動相的組成，以改善分離效果。一般用微量注射器直接進(jìn)樣，也可采用六通閥門進(jìn)樣。HPLC中所用的檢測器最多應(yīng)用的是紫外吸收檢測，靈敏度可達(dá)ng水平。此外，還有熒光檢測器、示差析光檢測器、電化學(xué)檢測器等。

　　常見應(yīng)用：

　　1、鑒定食物成分：鑒定食物成分的過程是相當(dāng)復(fù)雜的，包括分離、淬取、純化，而且還要有高效液相層析儀、質(zhì)譜儀、核磁共振儀、元素分析儀等先進(jìn)的分析儀器。

　　2、微波爐檢測農(nóng)藥殘留：首先是采集蔬果、茶葉，或土壞、環(huán)境中的樣品，加水混合稀釋，置入微波爐內(nèi)的燒瓶內(nèi)，一面攪拌，一面微波加熱。水被汽化后，會帶著化學(xué)物質(zhì)一起往上飄，經(jīng)冷卻系統(tǒng)凝結(jié)并搜集，最后再經(jīng)GC（氣相層析儀）或HPLC（高效率液相層析儀）檢驗。

　　3、從蛇毒中分離純化類凝血酶：采用陽離子交換層析、陰離子交換層析和凝膠排阻層析三步法從蛇毒中分離純化類凝血酶，在帶有梯度洗脫并能同時顯示紫外和電導(dǎo)參數(shù)裝置的高、中、低壓層析儀上進(jìn)行；性測定參照胰蛋白酶測定法，用BAEE作底物。該發(fā)明可以方便、快速地從蛇毒中提取類凝血酶，其純度和生物活性均可達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)。與傳統(tǒng)方法相比較，該發(fā)明生產(chǎn)工藝簡單，回收率高，活性損失小，并可幾乎線性放大到工業(yè)規(guī)?；a(chǎn)。

　　層析儀正確使用：層析儀是精密的儀器，流動相中的不溶物、緩沖液中鹽的析出、流動相中的氣泡、儀器管道或閥門內(nèi)長菌或微生物都會影響儀器的壽命或性能，在操作過程中對有關(guān)方面應(yīng)該特別注意，正確使用儀器以保證發(fā)揮儀器良好的性能并延長儀器壽命。

　　1、層析儀使用完畢后如果放置過夜，應(yīng)用低鹽緩沖液（最好是去離子水）徹底清洗所有管道和閥門。

　　2、如果層析儀一段時間不用，用去離子水清洗后，再用20%乙醇或0.05%疊氮化鈉溶液充滿管道，長期不用要把泵、閥門、檢測器等出入口用隨機帶的塞子封閉以免溶液揮發(fā)。防止儀器管道閥門內(nèi)部長菌或微生物，高溫天氣尤其要注意。長菌或微生物后很難除去。

　　3、層析儀存放應(yīng)置干燥通風(fēng)環(huán)境，防止儀器長霉菌或銹蝕。如果儀器放在低溫環(huán)境(冷室或?qū)游龉?，不要關(guān)閉電源，防止水蒸氣凝結(jié)。